1. ウイルス採取管の製造について
ウイルス採取管は医療機器製品に属します。国内メーカーの多くは第一種品に準じて登録されており、第二種品に準じて登録されている企業は少ない。最近、武漢などの緊急ニーズに応えるため、多くの企業が「第一種記録許可を申請する」という「緊急ルート」を利用している。ウイルス採取チューブは採取綿棒、ウイルス保存液、外装箱から構成されます。統一された国家規格や業界規格がないため、各メーカーの製品は大きく異なります。
1. サンプリング スワブ: サンプリング スワブはサンプリング部位に直接接触し、サンプリング ヘッドの材質はその後の検出に密接に関係します。サンプリングスワブヘッドはポリエステル（PE）系合成繊維またはレーヨン（人造繊維）製のものを使用してください。アルギン酸カルシウムスポンジや木製スティック綿棒（竹棒含む）は使用できません。また、綿棒ヘッドの材質も綿製品は使用できません。綿繊維はタンパク質の吸着力が強いため、その後の保存液に溶出しにくくなります。また、アルギン酸カルシウムや木の成分を含む木の棒や竹の棒が折れた場合、保存液に浸すとタンパク質も吸着され、さらにその後のPCR反応が阻害される可能性があります。スワブヘッドの材質にはPE繊維、ポリエステル繊維、ポリプロピレン繊維などの合成繊維の使用を推奨します。綿などの天然繊維はお勧めしません。ナイロン繊維（歯ブラシのヘッドと同様）は水を吸収するため、ナイロン繊維も推奨されません。不十分な場合、サンプリング量が不足し、検出率に影響を与えます。アルギン酸カルシウムスポンジは綿棒材料のサンプリングには使用できません。スワブのハンドルには折れ型と内蔵型の2種類があります。折れた綿棒はサンプリング後に保管チューブに入れられ、チューブのキャップはサンプリングヘッドに近い位置から破壊されて壊れます。内蔵のスワブは、サンプリング後にサンプリングスワブを保管チューブに直接入れます。また、保管チューブのチューブカバーが内蔵されています。小さな穴をハンドルの上部に合わせて、チューブカバーを締めます。2 つの方法を比較すると、後者の方が比較的安全です。折れたスワブを小さいサイズの保存チューブと組み合わせて使用する場合、折れたときにチューブ内に液体が飛散する可能性があり、誤った使用による汚染の危険に十分に注意してください。綿棒の柄の材質には中空ポリスチレン（PS）押出チューブまたはポリプロピレン（PP）射出折り目付けチューブの使用を推奨します。どのような材料を使用しても、アルギン酸カルシウム添加剤を添加することはできません。木の棒または竹の棒。つまり、サンプリング綿棒はサンプリング量と放出量を保証する必要があり、選択された材料にはその後の検査に影響を与える物質が含まれていてはなりません。
2. ウイルス保存液：市場で広く使用されているウイルス保存液は 2 種類あり、1 つは輸送媒体に基づいて改変されたウイルス保存液、もう 1 つは核酸抽出ライセート用に改変されたウイルス保存液です。
前者の主成分はイーグル基礎培地（MEM）またはハンクス平衡塩で、ウイルスの生存に必要な塩、アミノ酸、ビタミン、グルコース、タンパク質が添加されています。この保存液は指示薬および溶液としてフェノールレッドナトリウム塩を使用しています。pH値が6.6〜8.0の場合、溶液はピンク色になります。必要なブドウ糖、L-グルタミン、タンパク質を保存液に加えます。このタンパク質は、ウイルスのタンパク質シェルを安定化できるウシ胎児血清またはウシ血清アルブミンの形で提供されます。保存液には栄養素が豊富に含まれているため、ウイルスの生存に役立つだけでなく、細菌の増殖にも有益です。保存液に細菌が混入すると大量に繁殖してしまいます。その代謝物に含まれる二酸化炭素により、保存液の pH がピンク色から低下し、黄色に変わります。したがって、ほとんどのメーカーは製剤に抗菌成分を追加しています。推奨される抗菌剤は、ペニシリン、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン、ポリミキシン B です。アジ化ナトリウムと 2-メチルは推奨されません。4-メチル-4-イソチアゾリン-3-オン (MCI) や 5-クロロ-2-メチル-4 などの阻害剤です。 -イソチアゾリン-3-オン (CMCI) これらの成分は PCR 反応に影響を与えるためです。この保存液により提供されるサンプルは基本的に生きたウイルスであるため、サンプルのオリジナリティを最大限に保つことができ、ウイルス核酸の抽出や検出だけでなく、培養や培養にも使用することができます。ウイルスの分離。ただし、検出に使用する場合は不活化した後に核酸の抽出・精製を行う必要があることに注意してください。
核酸抽出ライセートをベースに調製された別の種類の保存液で、主成分は平衡塩、EDTAキレート剤、グアニジン塩（イソチオシアン酸グアニジン、塩酸グアニジンなど）、陰イオン界面活性剤（ドデカン硫酸ナトリウムなど）、陽イオン界面活性剤です。界面活性剤 (シュウ酸テトラデシルトリメチルアンモニウムなど)、フェノール、8-ヒドロキシキノリン、ジチオスレイトール (DTT)、プロテイナーゼ K およびその他の成分。この保存溶液はウイルスを直接切断して核酸を放出し、RNase を除去します。RT-PCR のみに使用する場合には、より適していますが、ライセートはウイルスを不活化する可能性があります。この種のサンプルはウイルス培養分離には使用できません。
ウイルス保存液に使用する金属イオンキレート剤は、EDTA塩（エチレンジアミン四酢酸二カリウム、エチレンジアミン四酢酸二ナトリウムなど）の使用が推奨されており、ヘパリン（ヘパリンナトリウム、ヘパリンリチウムなど）の使用は推奨されません。 PCR 検出に影響を与えないように。
3. 保存管: 保存管の材質は慎重に選択する必要があります。ポリプロピレン(Polypropylene)が核酸の吸着に関係していることを示唆するデータがあり、特に高張力イオン濃度においては、ポリプロピレン(Polypropylene)よりもポリエチレン(PolyEthylene)の方がDNA/RNAを把握しやすい。ポリエチレン - プロピレン ポリマー (ポリアロマー) プラスチックおよび一部の特別に加工されたポリプロピレン (ポリプロピレン) プラスチック容器は、DNA/RNA の保管に適しています。さらに、壊れやすい綿棒を使用する場合、綿棒が壊れたときに内容物が飛散して汚染されるのを防ぐために、保管チューブの高さが 8 cm を超える容器を選択する必要があります。
4. 製造保存液用の水：製造保存液に使用する超純水は、RNase、DNase、エンドトキシンなどの生物源からのポリマー不純物を確実に除去するために、分子量 13,000 の限外濾過膜で濾過する必要があります。通常の精製は推奨されません。水または蒸留水。
2. ウイルス採取チューブの使用
ウイルス採取管を使用した採取は、主に口腔咽頭採取と鼻咽頭採取に分けられます。
1. 口腔咽頭サンプリング：まず舌圧子で舌を押し、次にサンプリング綿棒の先端を喉まで伸ばして両側の咽頭扁桃と咽頭後壁を拭き、軽い力で咽頭後壁を拭きます。舌に触れないようにしてください。ユニット。
2. 鼻咽頭サンプリング：綿棒で鼻の先端から耳たぶまでの距離を測定し、指でマークし、垂直の鼻（顔）の方向に鼻腔にサンプリング綿棒を挿入します。綿棒は伸びます。耳たぶの少なくとも半分の長さから鼻の先端まで、綿棒を鼻の中に 15 ～ 30 秒間放置し、ゆっくりと 3 ～ 5 回回転させて綿棒を引き出します。
使用方法を見れば、口腔咽頭スワブであろうと鼻咽頭スワブであろうと、サンプリングは技術的な作業であり、困難であり、汚染されていることがわかります。収集されたサンプルの品質は、その後の検出に直接関係します。採取されたサンプルのウイルス量が低い場合、偽陰性が生じやすく、診断を確定することが困難です。
投稿日時: 2020 年 6 月 21 日
